The CAG promoter is a strong synthetic promoter frequently used to drive high levels of gene expression in mammalian expression vectors. CAG promoter was constructed in the lab of Dr Jun-ichi Miyazaki from the following sequences: (C) the cytomegalovirus (CMV) early enhancer element,(A) the promoter, the first exon and the first intron of chicken beta-actin gene,(G) the splice acceptor of the rabbit beta-globin gene
| Attributes | Values |
|---|
| type
| |
| label
| - CAG promoter
- CAG-Promotor
|
| comment
| - Der CAG-Promotor ist ein synthetisch erzeugtes DNA-Fragment, das in der Molekularbiologie, Biochemie, und Biotechnologie als Werkzeug bei der Erzeugung rekombinanter Proteine eingesetzt wird. Das DNA-Konstrukt dient dem Erreichen eines hohen Genexpressionslevels in eukaryotischen Zellen und somit zur Überexpression rekombinanter Proteine. Der CAG-Pomotor wurde im Labor von Yamamura Ken-ichi konstruiert. Er besteht aus (C), dem Humanen Cytomegalievirus (HCMV) early Enhancerelement, (A), dem Promotor, dem ersten nicht translatierten Exon und dem 5'-Teil des ersten Introns des beta-Aktin Gens von Hühnern, (G), dem 3'-Teil des zweiten Introns und dem 5'-Teil des dritten Exons des beta-Globin-Gens von Kaninchen.
- The CAG promoter is a strong synthetic promoter frequently used to drive high levels of gene expression in mammalian expression vectors. CAG promoter was constructed in the lab of Dr Jun-ichi Miyazaki from the following sequences: (C) the cytomegalovirus (CMV) early enhancer element,(A) the promoter, the first exon and the first intron of chicken beta-actin gene,(G) the splice acceptor of the rabbit beta-globin gene
|
| sameAs
| |
| topic
| |
| described by
| |
| subject
| |
| dbo:wikiPageID
| |
| Wikipage revision ID
| |
| dbo:wikiPageWikiLink
| |
| is primary topic of
| |
| wasDerivedFrom
| |
| http://purl.org/li...ics/gold/hypernym
| |
| dbo:abstract
| - Der CAG-Promotor ist ein synthetisch erzeugtes DNA-Fragment, das in der Molekularbiologie, Biochemie, und Biotechnologie als Werkzeug bei der Erzeugung rekombinanter Proteine eingesetzt wird. Das DNA-Konstrukt dient dem Erreichen eines hohen Genexpressionslevels in eukaryotischen Zellen und somit zur Überexpression rekombinanter Proteine. Der CAG-Pomotor wurde im Labor von Yamamura Ken-ichi konstruiert. Er besteht aus (C), dem Humanen Cytomegalievirus (HCMV) early Enhancerelement, (A), dem Promotor, dem ersten nicht translatierten Exon und dem 5'-Teil des ersten Introns des beta-Aktin Gens von Hühnern, (G), dem 3'-Teil des zweiten Introns und dem 5'-Teil des dritten Exons des beta-Globin-Gens von Kaninchen. Der CMV-Enhancer ist Bestandteil vieler eukaryotischer Expressionplasmide. Das Intron des Aktin-Gens weist ebenfalls eine Enhanceraktivität auf. Zudem erhöhen Introns in eukaryotischen Vektoren die Genexpression. Der Abschnitt aus dem beta-Globin Gen enthält eine für das Spleißen wichtige branch point sequence und ein Spliceakzeptorsequenz (3'-splice site). Auch wenn das synthetische Element als CAG-Promotor bezeichnet wird, ist es im strengen Sinn ein 5'-aktivierendes Element, da es neben dem Promotor noch den CMV-Enhancer, Intron- und Exon-Sequenzen enthält. Ein oft verwendeter Vektor, pCAGGS, der den CAG-Promoor enthält, wurde auf der Basis eines pUC-Vektors konstruiert. Er enthält zusätzlich das Polyadenylierungssignal des beta-Globin-Gens. Die Verwendung des CAG-Promotors erlaubt auch eine hohe Expression in transgenen Tieren und in fast allen Zelltypen von Säugern. So konnte in einer transgenen Mauslinie GFP mit Ausnahme der Erythrozyten und der Haare in allen Geweben nachgewiesen werden. Beim Einsatz in embryonalen Stammzellen hat der CAG-Promotor den Vorteil, dass es nicht zum Abschalten (Gen-silencing) seiner Expression kommt.
- The CAG promoter is a strong synthetic promoter frequently used to drive high levels of gene expression in mammalian expression vectors. CAG promoter was constructed in the lab of Dr Jun-ichi Miyazaki from the following sequences: (C) the cytomegalovirus (CMV) early enhancer element,(A) the promoter, the first exon and the first intron of chicken beta-actin gene,(G) the splice acceptor of the rabbit beta-globin gene The resulting synthetic element was used in the pCAGGS expression vector. The initiation codon located at the proximal region of the second exon was disrupted by digesting with NcoI restriction enzyme and replacing the site with a HindIII linker. Although the whole construct is commonly referred to as the "CAG promoter", it is not a promoter in a strict sense, as it includes a part of the transcribed sequence (the first exon and the first intron of chicken beta-actin gene) and enhancer elements. In addition to the CMV immediate early enhancer, the intron of the chicken beta actin gene contains an enhancer element, which is highly conserved among vertebrates. The 3' part of the promoter has high GC content and is thus refractory to PCR amplification.
|
| dbo:wikiPageLength
| |
| dbp:wikiPageUsesTemplate
| |
| is sameAs
of | |
| is topic
of | |
| is topic
of | |
| is http://vocab.deri.ie/void#inDataset
of | |
![[RDF Data]](/fct/images/sw-rdf-blue.png)
